免费看操片Iav黄色网I国精无码欧精品亚洲一区蜜桃I三级黄色免费I欧美大片免费播放器I日本a级黄绝片a一级啪啪I91成人一区二区三区Ix7x7x7成人免费视频I欧美一级一区二区三区I色噜噜狠狠色综合久I国产午夜小视频I亚洲一区二区在线观看视频I亚洲乱色熟女一区二区三区I99视频I久久1区I日本一区二区影院I国产精品久久久久久精I亚洲区精品I777亚洲I黄色小视频链接

18918841678
ARTICLE

技術文章

當前位置:首頁技術文章細胞培養基大盤點

細胞培養基大盤點

更新時間:2022-01-25點擊次數:5680

 

細胞培養基的概念
 

01

細胞培養基是人工模擬細胞在體內生長的營養環境,并提供細胞營養和促進細胞生長增殖的基礎物質。細胞培養基是細胞培養的基礎,它為動物細胞的健康快速成長提供營養物質。所以,只要用到細胞進行生物技術產品的生產制造,就勢必少不了細胞培養基。培養液或培養基,英文都是medium。當它是粉劑時,傾向性地稱為培養基,而將粉劑配成液體后,多稱為培養液。培養液中常需補加血清、抗生素等成分。                             

 

細胞培養基的分類
 
02

培養基主要有:天然細胞培養基、合成細胞培養基和無血清細胞培養基等。

天然細胞培養基是人們早期采用的細胞培養基,直接取自于動物組織提取液或體液,如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。營養價值高,但成分復雜,差異大、不穩定,來源也受限制。水解乳蛋白和膠原是兩種較好的天然培養基,富含氨基酸。血清是天然培養基中有效的培養添加物,但其組成成分復雜,其中一些成分與功能不明確。血清的來源有胎牛血清、小?;虺膳Q?、馬血清、雞血清、羊血清及人血清,廣泛應用的為胎牛血清和小牛血清。

合成細胞培養基是用化學成分明確的試劑配制的培養基,組分穩定,主要包括糖類、必需氨基酸、維生素、無機鹽類等。1950年,Morgan成功研制出具有確定化學成分的細胞培養液,即M199培養基,可用于培養多種種屬來源的細胞。1951年,Harry Eagle研發了動物細胞體外生長的人工合成培養基,即Eagle's minimum essential medium基(MEM培養基),是目前使用廣泛的合成細胞培養基之一。合成細胞培養基發展至今已有幾十種,除了沿用半個世紀的基礎合成細胞培養基之外,近年來還出現了營養成分更加豐富的低血清細胞培養基。

在細胞培養中,需要根據細胞種類和培養條件的不同選擇合適的合成細胞培養基。目前,在動物細胞培養中常用的基礎細胞培養基有BME、MEM、DMEM、RPMI-1640、Ham F12、M199 等。由于天然培養基的一些營養成分不能被合成細胞培養基*代替,因此一般需在合成細胞培養基中添加5%~10%的胎牛血清。胎牛血清的加入對細胞培養非常有效,但胎牛血清的成分復雜,這對培養產物的分離、純化和檢測會帶來一定的不便,為減少胎牛血清的影響,開發了營養成分更加豐富的低血清細胞培養基,可以將胎牛血清的使用量降低到1~3%。

無血清細胞培養基(serum free medium, SFM)是指在使用中無需添加血清的細胞培養基,且其組成成分不含有任何動物組分。按照其組分分類,還可以分為無動物組分無血清細胞培養基和化學限定無血清細胞培養基,前者組分中可能含有某些植物來源成分,而后者*由化學成分明確的組分組成。

其中,無動物組分無血清細胞培養基是目前在生物制藥行業中應用廣泛的,它提高了細胞培養的質量,避免了使用血清帶來的麻煩。目前,已有多種無血清培養基上市,如雜交瘤細胞無血清培養基、CHO細胞無血清培養基、Vero細胞無血清培養基和NS0 細胞無血清培養基等。無血清培養基通常添加生長附加成分,如激素與生長因子、低分子營養成分和轉鐵蛋白等促細胞生長的附加成分,一般包括胰島素、孕酮、sodium selenate、腐胺、轉鐵蛋白等。

   

 

細胞培養基的基本成分
 
03

細胞培養基的主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質。人工合成培養基使用時還需添加一定量的血清使細胞生長和繁殖。

氨基酸:組成蛋白質的基本單位。不同的細胞對氨基酸的需求各異,但幾種必需氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養液提供,如組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸、半胱氨酸、酪氨酸等。其余非必需氨基酸,細胞可以自己合成,或通過轉氨作用由其他物質轉化而來。絕大部分細胞對谷氨酰胺有較高的要求,因為谷氨酰胺是作為能源及碳源物質同時被細胞利用,是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡,所以各種培養液中都含有較多的谷氨酰胺。細胞所能利用的氨基酸是L型同分異構體,D型氨基酸不能被利用。

維生素:維持細胞生長的一種生物活性物質,對細胞代謝有重大作用。它們在細胞中大多形成酶的輔基或輔酶,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進行。維生素分為水溶和脂溶兩大類,培養液中直接采用ATP和CoA。

葡萄糖:大部分培養基都以葡萄糖作為能量來源之一。

無機鹽:維持培養基滲透壓平衡,參與細胞的代謝活動。主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+ 等。Na+是細胞外液中最主要的陽離子,對維持滲透壓的恒定有決定性的作用。K+主要分布在細胞內液,細胞內K+對于激活某些酶是必需的,并在調節細胞內環境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+在細胞外液中的作用是將組織內部細胞之間相互粘著,在細胞內參與許多重要的細胞生理活動,如傳導、參與肌肉細胞收縮等。在懸浮培養時,為了減少細胞的聚集和附著,要減少Ca2+的濃度。Mg2+是構成細胞間質的重要成分,對于細胞間相互穩定結合有很重要的意義。磷的化合物對細胞物質代謝和生理功能調控有重要作用。

其他成分:表皮生長因子、胰島素、多肽、核苷、嘌呤等??蓭椭毎目寺』囵B及維持某些特殊細胞系的生長。

  

 

血清的應用
 
04

血清:用于細胞培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養細胞的原因主要是來源充足、制備技術成熟、經過長期的實際應用人們對其有比較深入的理解。

牛血清可分為胎牛血清、新牛血清、小牛血清。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛。新牛血清取自出生24小時之內的新生牛。小牛血清取自出生10~30 天的小牛。其中,胎牛血清品質好是因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。牛血清中含有豐富的細胞生長必須的營養成份,具有極為重要的功能。

血清的主要作用:1) 提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。2) 提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質激素(Cortisol、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3) 提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。4) 提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷,對培養中的細胞起到某些保護作用。

血清的優點和缺點:血清是非常復雜的混合物,成分多樣,含有各種生理平衡的分子量差別很大的生物分子,有的對細胞生長有促進作用,如含有攜帶激素、礦物質、微量元素和脂類物質的轉運蛋白等。血清能夠提供細胞貼壁因子和擴散因子。血清中含有起穩定作用和解毒的因子,能夠維持培養基的pH 值并抑制蛋白酶直接或間接的酶解。

但是,血清的加入也帶來了很多問題:1) 血清的成份可能有幾百種之多,目前對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難。2) 血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續性受到限制。3) 不能排除血清中含有易變物質。4) 對大多數細胞,在體內狀態,血清不是它們接觸的生理學液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態,血清可能促進某些細胞的生長(成纖維細胞)同時抑制另一類細胞生長(表皮細胞)。5) 血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌毒素等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。6) 取材中可能帶入支原體、病毒,對細胞產生潛在影響。7) 血清的使用使得實驗和生產的標準化困難,其中的蛋白質使得某些轉基因蛋白生物藥品生產中分離純化工作很難完成。8) 大規模生產中,血清來源越來越困難,價格昂貴,是構成生產成本的主要部分之一。9) 為了使與傳染源相關的風險減少到minimum,存在多個國家間限制進出口生物材料的國際法規。

 

 

細胞培養基產品舉例
 
05

貨號 產品名稱 規格
Gibco進口部分
11875093 RPMI 1640 Medium 500ml
11965092 DMEM,高糖 500ml
11995065 DMEM,高糖,含丙酮酸鹽 500ml
11330032 DMEM/F-12,HEPES 500ml
11090081 MEM,不含谷氨酰胺 500ml
16600082 McCoy's 5A (改良)培養基 500ml
14200075 DPBS (10X),無鈣、無鎂 500ml
31985070 Opti-MEM™ I 減血清培養基 500ml
15140122 青霉素-鏈霉素(10,000 U/mL) 100 ml
25200072 胰蛋白酶-EDTA (0.25%),含酚紅 500ml
25200056 胰蛋白酶-EDTA (0.25%),含酚紅 100 ml
12561049 MEM α,無核苷 1000ml
17504044 B-27™ Supplement (50X), serum free 10ml
17504001 B-27™ Supplement (50X), serum free 100 mL
17502048 N-2 添加劑 (100X) 5ml
17502001 N-2 添加劑 (100X) 50ml
17101015 II 型膠原酶,粉末 1g
17104019 IV 型膠原酶,粉末 1g
12440053 IMDM 500ml
10270106 南美血清 500ml
10099141 澳洲胎牛血清 500ml
10099141C Fetal Bovine Serum, 澳洲胎牛血清 500ml
21127022 Ham's F-12K (Kaighn's) 培養基 500ml
14190144 DPBS,無鈣、無鎂 500ml
11095080 MEM 500ml
10010023 PBS,pH 7.4 500ml
Gibco國產部分
C11995500BT DMEM basic (1X) 500ml
C11875500BT RPMI Medium 1640 basic (1X) 500ml
C10010500BT PBS pH 7.4 basic (1X) 500ml
C12571500BT MEM Alpha basic (1X) 500ml
C11330500BT DMEM/F-12,HEPES 500ml
C11885500BT DMEM,低糖,含丙酮酸鹽 500ml
C11965500BT DMEM,高糖 500ml
C11095500BT MEM 500ml
C11765500BT Ham's F-12 Nutrient Mix 500ml
C11150500BT 199 培養基,Earle's 平衡鹽 500ml
附帶:Corning耗材(部分
3516 6孔細胞培養板 50塊/箱,1塊/包
3513 12孔細胞培養板 50塊/箱,1塊/包
3524
24孔細胞培養板 100塊/箱,1塊/包
3548 48孔細胞培養板 100塊/箱,1塊/包
3599 96孔細胞培養板 100塊/箱,1塊/包
3799 96孔U底細胞培養板 50塊/箱,1塊/包
430165 35mm細胞培養皿 25包/箱,20個/包
430166 60mm細胞培養皿 25包/箱,20個/包
430167 100mm細胞培養皿 25包/箱,20個/包
430599 150mm細胞培養皿 12包/箱,5個/包
430168 25cm正方斜口細胞培養瓶 25包/箱,20個/包
430639 25cm正方透氣蓋斜口細胞培養瓶 10包/箱,20個/包
430720 75cm正方黃蓋斜口細胞培養瓶 20包/箱,5個/包
430641 75cm正方透氣蓋斜口細胞培養瓶 20包/箱,5個/包
430823 150cm正方斜口細胞培養瓶 10包/箱,5個/包
430825 150cm正方透氣蓋斜口細胞培養瓶 10包/箱,5個/包

   

上海昆盟生物科技有限公司
Coweldgen Scientific
返回列表
  • 聯系地址

    上海市徐匯區銀都路466號聚科生物園1號樓303室
  • 聯系郵箱

    kunmsales006@163.com
  • 聯系電話

    021-51216810
  • 聯系QQ

    550138389

版權所有©2026 上海昆盟生物科技有限公司   備案號:滬ICP備19032849號-2

技術支持:化工儀器網  管理登陸  sitemap.xml

主站蜘蛛池模板: 国产精品xx| 杂技xxx裸体xxxx欧美| 女同性69囗交| 亚洲精品视频在线观看视频| av永久免费| 99热碰| 日韩美女少妇| 少妇裸体视频| 美女大黄网站| 成人app在线播放| √天堂资源在线中文8在线最新版| 久久久久人妻一区精品色欧美 | 欧美日韩亚洲另类| 日韩精品一区二区三区久久| 日本69视频| 日本69少妇| 亚洲色妞| jizz在线观看| 成人免费黄色| 99精品在线| 天天操狠狠操夜夜操| 国产精品熟女一区二区不卡| 91精品久久人妻一区二区夜夜夜| 女人高潮娇喘1分47秒| 校园春色 亚洲色图| 制服丝袜中文字幕在线| 神马午夜激情| 玖玖在线视频| 黄色三级三级| 另类天堂网| 四虎4hu| 区区区区区区7777| 被c到喷水嗯h百合gl| av动漫在线观看| av字幕网| 国精产品一区二区三区有限公司| av成人在线播放| 欧美日批视频| av成人免费观看| 日韩逼| 成人免费看黄色片| 天天干天天曰| 亚洲tv在线| 国产特级淫片免费看| 日韩高清一级| 国产亚洲精品成人| 老女人老91妇女老热女| 波多野结衣成人在线观看| 性久久久| 九九色| 亚洲污网站| www.射| 成人综合网址| 在线婷婷| 色悠悠在线视频| 思思久久久| 国产精品成人一区二区三区| 日本美女一级片| 天天摸天天干| 亚洲欧美日韩系列| www.午夜av| 国产精品性做久久久久久| 欧美不卡三区| 特级a做爰全过程片| 另类老妇性bbwbbw图片| 窝窝在线视频| 欧美a在线观看| 夜夜操夜夜操| 日韩中文久久| 欧美日韩精品| 四虎精品永久在线| 国产精品专区在线| 毛片在线免费视频| 在线视频h| 日本在线视频www| 黄色av网页| 日韩极品在线观看| 优优色综合| 国产视频不卡一区| 国产精品高潮视频| 美女又爽又黄| 色激情五月| 久久久精品一区二区三区| 男女视频久久| 国产女厕一区二区三区在线视| 国产xxxx视频| 黄色片链接| 国产在线观看成人| 国产三级a| 国产精品人妻| 初尝黑人巨炮波多野结衣| 台湾佬久久| 久久伊人91| 人人妻人人澡人人爽精品日本| 亚洲色图欧美另类| 日本狠狠爱| 在线观看超碰| 中文字幕2区| 中文字幕偷拍| 91亚洲国产精品| 色哟哟精品一区二区| 久久综合色狠狠色| 伊人超碰在线| 国产精品久久久久久久久夜色| 人人爱人人插| 特级特黄aaaa免费看| 国产农村熟妇videos| 黄色网在线| 精品视频在线看| 成年片黄色日本大片网站视频| 好大好爽好舒服| 日韩制服在线| 国产一区二区播放| 在线免费看污网站| 天堂在线91| 91老师片黄在线观看| 一级黄色片久久| 成人精品毛片| 91欧美激情一区二区三区成人| 四虎网址在线| 亚洲理论视频| 亚洲区视频在线观看| 国产精品对白刺激久久久| 国产精品成人免费| 日日夜夜撸撸| 污污网站免费| 在线免费观看黄色网址| 午夜在线免费观看| 亚洲男女网站| 久久97人妻无码一区二区三区| 精品九九九九| 亚洲午夜视频在线| 一区二区日韩| 无码日韩人妻精品久久蜜桃| 亚洲成人av免费| 男人的天堂一区二区| 九九热精| 天天操天天弄| 国产美女自拍视频| 国产靠逼网站| 日本久久视频| 亚洲女优视频| 亚洲精品男人的天堂| 在线观看成人| 欧美五月| 不卡的日韩av| 欧美日韩aaa| 国产福利社区| 欧美色激情| 一区二区网站| jlzzzjlzzz国产免费观看| 天堂av2018| 操操日| 亚洲jizzjizz| 大陆熟妇丰满多毛xxxⅹ| 天堂草原电视剧在线观看图片高清| 灌篮高手全国大赛电影| 日本一区成人| 97夜色| 久久91视频| 久久香蕉网| 久久视频一区二区| 激情综合小说| av制服丝袜在线| 欧美性久久| 91精品国自产| 欧美永久精品| 在线免费观看污| 免费爱爱视频| 亚洲欧美一区二区三区四区五区| www.污污| 国产欧美日韩精品在线| 日韩欧美中文字幕在线视频 | 亚洲视频456| 欧美一区二区三| 亚洲精品一级片| 久久成人a毛片免费观看网站| 亚洲自拍一区在线观看在线观看| 日本久久网| 日韩av无码免费播放| 国精产品一品二品国精品69xx| 日韩精品免费一区二区三区| 亚洲成人一二区| 五级黄高潮片90分钟视频| 诱惑の诱惑筱田优在线播放| 久久五月婷| 国产第20页| 性毛片| 中文字幕国产在线观看| 中文字幕四区| 19禁国产精品福利视频| 国产熟妇一区二区三区四区| 五月av在线| 青青视频免费| 懂色aⅴ一区二区三区免费| 精品欧美一区二区三区| av免费在线电影| 国产一区二区三区视频在线播放| 国产精品成人国产乱| 成人高清免费| 成av人片一区二区三区久久| 神马午夜伦理| 欧美黄色小视频| 嫩草网站| 亚洲乱码国产乱码精品| 日本不卡免费在线| 97人妻人人澡人人爽人人精品| 极品少妇在线观看| 成人免费网站在线| 亚洲永久精品在线观看| 东南亚毛片| 久久a视频| 亚洲最大网站| 国产精品v| 丝袜国产在线观看| 日本成人在线免费视频| aaa在线视频| 久久性感美女视频| 成人在线视频免费播放| 91免费黄| 天天爽视频| 中国小鲜肉xvideoscom| 女女同性女同一区二区三区av| www.欧美成人| 欧美日韩人妻一区二区| 性色在线观看| mm131在线| 182在线视频| 91琪琪| 琪琪午夜伦理影院7777| av网站在线免费看| 欧美日韩99| h片在线播放| 黄色免费国产| 国产日韩欧美二区| 天天色姑娘| 国内精品嫩模av私拍在线观看| 欧美白人最猛性xxxxx69交| 香蕉私人影院| 好吊妞在线播放| 老熟妇毛茸茸| 免费成年人视频| 99热97| 亚洲国产综合久久| 老汉av网站| 中国老太做爰免费视频| 日本高清有码| 日韩成人在线观看| 91久久免费视频| 国产夫妇交换聚会群4p| 特黄1级片| 悠悠av| 黄色av大片| 日本综合伊人| 婷婷精品视频| 国产精品1页| 亚洲丝袜av| 色xxxxxx| 91av视频网站| 日本色www| 夜夜躁狠狠躁日日躁av麻豆| 国产精品18久久久久久vr下载| 精品国产一区二区三区性色av| 男女吃奶视频| 香蕉视频污在线观看| 好看的日韩av| 小视频在线观看| 色偷偷五月天| 一级黄色免费观看| 图片一区二区| 五月天在线播放| 污污小说在线观看| 日本黄色大片网站| 在线天堂v| av影片在线| 狠狠亚洲| 国产做受入口竹菊| 亚洲一区波多野结衣在线观看| 天堂在线日本| 99成人在线| 欧美日韩一级片在线观看| 日本精品免费视频| 奇米影视第四狠狠777| 日韩精品乱码久久久久久| av看片网站| 天天舔天天舔| 国产又粗又猛大又黄又爽| 亚洲国产aⅴ精品一区二区| 老司机亚洲精品影院| 黄色精品| 亚洲免费福利| 精品视频在线观看| 三级黄色片网站| 插综合| 国产亚洲自拍av| 国内精品久久久久久久日韩| 国产精品久久久久桃色tv| 粉嫩av久久一区二区三区| 久久久6| 亚洲精选91| 在线天堂v| 国产精品视频一区二区三区四区五区 | 古装做爰无遮挡三级视频| 午夜影院视频| 视频在线观看一区| 国产色宗合| 日韩欧美成人一区| jizz免费视频| 办公室添的我好爽在线视频 | 黄色网页免费在线观看| 交视频在线播放| 国产精品视频一二三区| 视频在线不卡| www.羞羞答答在线观看蜜桃臀| 午夜xxxxx| 日日夜精品| 亚洲网站在线观看| 国产精品婷婷| 老司机综合网| 一区二区视频免费| 日韩欧美第二页| 亚洲天堂ww| 草视频在线| 日韩黄色视屏| 国产精品香蕉在线| 日韩免费黄色| 欧洲高潮三级做爰| 日本寂寞少妇| 久久综合免费| 就爱操av| 九色porny原创自拍| 欧美xxxxxx片免费播放软件| av福利网址| 欧美日韩理论片| 欧美三级成人| 亚洲欧美在线视频观看| 青娱乐欧美| 青青草偷拍视频| 99久久精品免费看国产交换| 色玖玖综合| 国产一区二区三区影院| 国产精品免费一区二区区| 国产真实在线| 国产做受入口竹菊| 天堂资源av| 午夜寂寞影视| 欧美视频网站| 成人在线观看免费| 粗大的内捧猛烈进出在线视频| 国产一区亚洲二区| 99视频精品在线| 亚洲图片视频在线| 91在线网| 欧美三级久久| 色男人av| 尤物视频网站在线观看| 插插插av| 中日韩精品视频在线观看| 成人精品免费视频| 男人午夜av| 草莓视频成人在线| 91av视频免费观看| 国内精品久久久| 自拍偷拍激情小说| 中文字幕在线观看日韩| 色在线网站| 91在线一区二区三区| 99热免费| 亚洲成a人片在线www| 国产调教打屁股xxxx网站| 三级小视频在线观看| 爱爱小视频网址| 久久国内视频| 久久久久97国产| 欧美成人黄色| 少妇偷人精品无码人妻| 91片看| 欧洲一级黄色片| 国产啪视频| 欧洲一区二区在线观看| 国产一级α片| 午夜看片福利| 婷婷网站天天婷婷网站| 麻豆导航| 青青草国产在线观看| 亚洲一区在线观看视频| 日韩毛片儿| 成人午夜在线| 激情五月深爱五月| 久久精品视频免费播放| 女人扒开屁股让男人捅 | 精品久久毛片| 全部免费毛片在线播放一个| 日韩高清不卡| 尤物av午夜精品一区二区入口| 精品少妇爆乳无码av无码专区| 国产69熟| 国产成人av电影| 亚洲一级免费视频| 成人免费观看网站| 国产又粗又猛又爽又黄| mm131美女视频| h在线观看视频| 国产乱码在线观看| 日本一级爽快片淫片高清| 欧美一级射| 欧美videos另类精品| 在线亚洲自拍| 日本黄在线| 婷婷夜夜| 麻豆a级片| 国产热99| 日本无遮羞调教打屁股网站| 天天人人| 人人草人人| 韩国av在线免费观看| 国产老头和老头xxxx×| 我的精彩人生免费观看| 午夜久久久久久噜噜噜噜| 永久www成人看片| 国产小视频一区| 欧美美女一区| 日韩免费高清av| 欧美国产在线视频| 中文字幕在线播放第一页| 亚洲精品xxxx| 欧洲色区| 婷婷丁香六月天| 久久精品婷婷| 爱豆国产剧免费观看大全剧集| 91av在线免费视频| 日韩xx视频| 久久艹在线观看| 精品国产a线一区二区三区东京热| 激情欧美日韩| 毛片随便看| 日韩爽爽视频| 免费欧美一级| 黄色网一级片| www.日本在线| 毛片免| 久色阁| 成年人性生活免费视频| 桃色视频| 日日夜夜影院| 天天射天天草| 丁香六月欧美| 午夜精品久久久久久久99热影院| 欧洲精品国产| 亚洲一区色| 亚洲欧美日韩在线高清直播| 91禁蘑菇在线看| 玩日本老头很兴奋xxxx| 24小时日本在线www免费的| 九色精品视频| 91最新国产| 极品销魂美女一区二区三区| 视频二区在线观看| 热久久亚洲| 成人日韩在线| 激情av在线| 日本欧美黄色片| 99热这里| 日产牛牛在线| 午夜视| 色射综合| 青青青手机视频在线观看 | 国产婷婷一区二区三区| 成人午夜毛片| 97自拍视频在线| 日日噜噜噜夜夜爽爽狠狠视频97| 亚洲国产综合网| 五月婷婷六月丁香综合| 黑人番号| 熟妇人妻一区二区三区四区| www.在线观看麻豆| xxx在线免费观看| 视频久久| www.欧美亚洲| 日本免费在线一区| 精品一区二区电影| 黄色av国产| 青青草福利| 窝窝午夜精品一区二区| 天天插天天操| 亚洲黄色在线网站| 亚洲免费网站在线观看| 亚洲午夜电影在线观看| 久久国内偷拍| 999av| 99视频网站| 伊人久色| 中文字幕av无码一区二区三区| 性色浪潮av| 黄色免费一级片| 国产精品88久久久久久妇女| 天天碰天天爽天天摸天天躁| 久久av免费| 久久中文字幕人妻| 制服丝袜中文字幕在线|